El acortamiento de los telómeros se asocia con la respuesta al estrés de la corticosterona en las golondrinas de mar adultas

December 5, 2022 0 Comments

Cuando los vertebrados se enfrentan a acontecimientos estresantes, el eje hipotálamo-hipófisis-suprarrenal (HPA) se activa, generando un rápido aumento de las hormonas del estrés glucocorticoides (GC) circulantes, seguido de un retorno a los niveles iniciales. Sin embargo, la activación repetida del eje HPA puede provocar un aumento del estrés oxidativo. Uno de los objetivos del estrés oxidativo son los telómeros, complejos nucleoproteicos situados al final de los cromosomas que se acortan en cada división celular.

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La susceptibilidad de los telómeros a las moléculas oxidantes ha llevado a la hipótesis de que el aumento de los niveles de GC potencia el acortamiento de los telómeros, pero los estudios sobre esta relación son escasos. Estudiamos si, en las golondrinas de mar Hirundo rustica, los cambios en la longitud de los telómeros de los eritrocitos adultos entre dos temporadas de cría consecutivas están relacionados con la respuesta al estrés de la corticosterona (CORT) (el principal GC aviar) inducida por un protocolo estándar de captura-restricción.
La longitud de los telómeros dentro del individuo no cambió significativamente entre temporadas de cría consecutivas. Los individuos de segundo año mostraron el mayor aumento de las concentraciones de CORT circulante tras la restricción.

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Además, encontramos un descenso en la respuesta al estrés de las hembras a lo largo de la temporada de cría. Además, el acortamiento de los telómeros coincidió con la respuesta al estrés: un retraso en la activación del bucle de retroalimentación negativa que termina la respuesta al estrés se asoció con un mayor desgaste de los telómeros. Por lo tanto, la variación entre individuos en la respuesta al estrés puede afectar a la dinámica de los telómeros.

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DiscoveryProbe? DNA Damage/DNA Repair Library
L1033-5 ApexBio
T7 DNA
310-005 GeneOn
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Variación de la corticosterona dependiente del contexto y divergencia fenotípica de las poblaciones de Rana arvalis a lo largo de un gradiente de acidificación

Antecedentes: Los procesos fisiológicos, como respuestas inmediatas al entorno, son importantes mecanismos de plasticidad fenotípica y pueden influir en la evolución a escalas de tiempo ecológicas. En entornos estresantes, las respuestas fisiológicas al estrés de los individuos se inician e integran a través de la liberación de hormonas, como la corticosterona (CORT). En los vertebrados, la CORT influye en el metabolismo energético y la asignación de recursos a múltiples rasgos de aptitud (por ejemplo, el crecimiento y la morfología) y puede ser un importante mediador de la adaptación rápida al estrés ambiental, como la acidificación. La rana de páramo, Rana arvalis, muestra una divergencia adaptativa en las historias de vida de las larvas y en los rasgos de defensa contra los depredadores a lo largo de un gradiente de acidificación en Suecia. Aquí damos un primer paso para entender el papel de la CORT en esta divergencia adaptativa. Realizamos un experimento de laboratorio completamente factorial y criamos renacuajos de tres poblaciones (una ácida, una neutra y una de origen de pH intermedio) en dos tratamientos de pH (pH ácido versus pH neutro) desde la eclosión hasta la metamorfosis. Probamos cómo las poblaciones difieren en los perfiles de CORT de los renacuajos y cómo el CORT se asocia con la historia de vida de los renacuajos y sus rasgos morfológicos.

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Abbexa
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Resultados: Encontramos claras diferencias entre las poblaciones en los perfiles de CORT a lo largo de las diferentes etapas de desarrollo, pero sólo efectos débiles del tratamiento del pH sobre la CORT. Los renacuajos de la población de origen ácido tenían, en promedio, niveles de CORT más bajos que los renacuajos de la población de origen neutro, y la población de origen de pH intermedio tenía niveles de CORT intermedios. En general, los renacuajos con mayores niveles de CORT se desarrollaron más rápidamente y tuvieron colas más cortas y menos profundas, así como músculos de la cola menos profundos.
Conclusiones: Nuestros resultados del jardín común indican entre la población divergencia en los niveles de CORT, probablemente reflejando la selección divergente mediada por la acidificación en la fisiología de los renacuajos, concomitante a la selección en las historias de vida de las larvas y la morfología. Sin embargo, los niveles de CORT fueron altamente dependientes del contexto ambiental. En conjunto, estos resultados indican un posible papel de la CORT como mediador de la divergencia de múltiples rasgos a lo largo de los gradientes de estrés ambiental en las poblaciones naturales. Al mismo tiempo, las diferencias a nivel de población y la alta dependencia del contexto en los niveles de CORT sugieren que la evaluación instantánea de CORT en la naturaleza puede no ser un bioindicador fiable del estrés.

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La separación materna en la fase luminosa u oscura del ciclo circadiano tiene diferentes efectos sobre los niveles de corticosterona y el comportamiento ansioso en ratas adultas macho

Los cuidados maternos en los primeros años de vida son esenciales para el crecimiento y el desarrollo de las crías. La fase de luz del ciclo circadiano es la fase de mayor cuidado de la madre hacia sus crías. Por lo tanto, nuestra hipótesis es que, a largo plazo, la separación materna (un modelo de estrés en los primeros años de vida) en la fase de luz puede ser más perjudicial que la separación materna en la fase de oscuridad.
Este estudio pretende comparar los efectos de la separación materna en la fase oscura o luminosa del ciclo circadiano sobre los parámetros conductuales y fisiológicos de las ratas Wistar macho adultas. Del primer al decimocuarto día de vida, las camadas fueron separadas de sus madres durante seis horas, formando los siguientes grupos experimentales Control (C), Separación Maternal en la Luz (MSL), y Separación Maternal en la Oscuridad (MSD).

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Tras el destete, estos grupos se dejaron sin perturbar hasta el inicio de las pruebas de comportamiento en la edad adulta. Se evaluaron las medidas conductuales (ingesta de dieta estándar, ingesta de dieta palatable y comportamiento de ansiedad en el laberinto elevado), así como el peso del tejido adiposo retroperitoneal y los niveles de corticosterona en respuesta al estrés alimentario, entre los 120 y 180 días de edad. Los resultados mostraron que, en la edad adulta, la ingesta de alimentos tras un ayuno de ocho horas o el estrés alimentario no había cambiado. El comportamiento de ansiedad se analizó midiendo el tiempo en los brazos abiertos o cerrados del laberinto elevado.
Los niveles de corticosterona se midieron tras el estrés alimentario y se cuantificaron mediante el método de ensayo inmunoenzimático (ELISA). También se midió el peso del tejido adiposo retroperitoneal. El grupo MSD presentó mayores niveles de corticosterona (MSD = 173,9±12,7) en comparación con los grupos C (4,21 ± 0,3) y MSL (4,25 ± 0,28, p < 0,001). En la prueba de ansiedad, se observó que la duración en el brazo abierto fue menor para el grupo MSL (27,4 ± 3,7) en comparación con el control (112,9 ± 9,6, p < 00,1). No hubo ningún cambio en el grupo MSD en comparación con el control, con respecto al tiempo de permanencia en el brazo abierto del laberinto.

Rat Cholesterol ELISA ELISA
E01A11128 BlueGene
Goat Cholesterol ELISA ELISA
E01A46041 BlueGene
Mouse Cholesterol ELISA ELISA
E01A19869 BlueGene
Human Cholesterol ELISA ELISA
E01A2368 BlueGene
Sheep Cholesterol ELISA ELISA
E01A98335 BlueGene

Se observó un efecto de la separación materna sobre el consumo de una dieta palatable. Hubo un aumento en el consumo de dieta palatable en los grupos MSL (16,3 ± 1,9) y MSD (15,7 ± 0,5) en comparación con el control (11,4 ± 1,2, p < 0,05). En respuesta al estrés y a la privación de alimentos, no hubo diferencias entre los grupos en el consumo de alimentos. El peso del tejido adiposo fue mayor en el grupo MSD (7,12 ± 0,29) en comparación con los grupos control (4,21 ± 0,3) y MSL (4,25 ± 0,28, p < 0,001).
Basándonos en los resultados observados, concluimos que el estrés en fase ligera es más perjudicial para el comportamiento emocional durante las dos primeras semanas de vida, y el estrés en fase oscura es más perjudicial para el funcionamiento del eje hipotálamo-hipófisis-suprarrenal (HPA). Además, la mayor ingesta de una dieta palatable podría interpretarse como una conducta de afrontamiento a estas modificaciones tempranas relacionadas con el estrés.

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Análisis del transcriptoma basado en RNA-seq del efecto protector del extracto de etanol del azafrán contra la lesión de las células PC12 inducida por la corticosterona

Antecedentes: En la actualidad, los antidepresivos orales se utilizan habitualmente en el tratamiento clínico de la depresión. Sin embargo, el tratamiento farmacológico actual puede dar lugar a reacciones adversas más graves. Por lo tanto, nos centramos en la medicina tradicional china, tratando de encontrar una medicina alternativa o complementaria eficaz y segura. El Crocus sativus (azafrán) es una medicina tradicional china a base de hierbas, que suele utilizarse en la clínica para regular la ansiedad, el insomnio, la amnesia y otros trastornos mentales. El estudio tenía como objetivo explorar el efecto neuroprotector del extracto de etanol de azafrán (EES) sobre la lesión inducida por la corticosterona (CORT) en las células PC12 y explorar además su posible mecanismo.

Protein G Beads (25ml)
Alphabioregen
Stepped Micro Tip (includes Interface Washers)
0-120-0005 Biologics
Tapered Micro Tips
0-120-0007 Biologics
Tapered Micro Tips 5 mm Diameter Tapered Titanium Micro Tip
0-120-0008 Biologics
10 mm Diameter Solid Titanium Tip
0-120-0009 Biologics

Métodos: La autenticidad del azafrán y los componentes activos del EES se identificaron mediante una prueba de agua y un sistema de espectrometría de masas de cromatografía líquida de ultra rendimiento en tiempo de vuelo. El cribado de la citotoxicidad de las células PC12 se incubó con EES en diferentes concentraciones durante 24 h, y la eficacia protectora de EES sobre la lesión de las células PC12 inducida por CORT (500 μM), la viabilidad de las células se evaluó mediante el ensayo del Kit de Recuento Celular-8 (CCK-8). Los genes expresados diferencialmente (DEGs) de las células PC12 protegidas por EES se analizaron mediante el método RNA-seq, y los resultados se analizaron para el enriquecimiento GO y KEGG. Los resultados de RNA-seq fueron verificados por el análisis de qPCR.

Protein G Beads (25ml)
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Tapered Micro Tips 5 mm Diameter Tapered Titanium Micro Tip
0-120-0008 Biologics

Resultados: El azafrán se identificó inicialmente como auténtico en la prueba de agua y 10 compuestos fueron identificados por Cromatografía Líquida de Ultra Rendimiento (UPLC)-Espectrometría de Masas (MS). Los resultados de CCK-8 demostraron que el EES en concentraciones superiores a 640 μg/mL ejercía un cierto efecto citotóxico, y las células PC12 pretratadas con EES (20, 40 y 80 μg/mL) revirtieron significativamente la muerte celular inducida por CORT 500 μM. El análisis de ARN-seq mostró que EES regulaba 246 genes diferenciales, que estaban principalmente enriquecidos en la vía de señalización MAPK. Dusp5, Dusp6, Gadd45b, Gadd45G y Pdgfc fueron validados además por qPCR. Los datos experimentales mostraron que los resultados de la qPCR eran consistentes con la RNA-seq.
Conclusiones: Estos hallazgos proporcionan una comprensión innovadora del mecanismo molecular del efecto protector de EES en las células PC12 a nivel de transcripción molecular, y Dusp5, Dusp6, Gadd45b, Gadd45g, y Pdgfc pueden ser potenciales nuevos objetivos para el tratamiento antidepresivo.

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